据上海疾控消息,昨晚,上海红房子医院封闭的消息被顶上微博热搜,@上海发布通报称“该院在开展全院例行新冠肺炎核酸检测中发现个别不合格样本”。好在今天凌晨,所有检测样本经复核均为阴性。
虽然目前事件原因尚不可知,但核酸检测的确可能出现“假阳性”结果。
首先,我们来了解一下为什么感染了新冠病毒能测出核酸?
新冠病毒属于β属的冠状病毒,有包膜,颗粒呈圆形或椭圆形,常为多形性,直径60-140 nm,遗传物质为RNA。
新冠病毒的超微结构示意图
一旦感染了新冠病毒,它就会入侵被感染者的鼻腔、咽部等位置,我们在这些部位采样获取病毒本体,送到实验室进行PCR检测,通过检测样本中是否含有病毒核酸,就能判断是否被感染。
再来了解一下PCR检测这项技术
对于新冠病毒,我们采用的是逆转录荧光定量PCR技术,这项技术可以将样本中微量甚至痕量的病毒核酸扩大上百万倍,便于我们从专用设备上直观地读取。
但是,任何检测技术都不会100%保证结果的准确性,有时候核酸检测阳性是“假阳性”
虽然从PCR引物和探针设计的原理看,出现“假阳性”的概率是很低的,并且试剂在审批上市过程中,也经过了检测特异性的性能确认,但在实际工作中,还是有可能出现“假阳性”。
① 试剂偶发的非特异性扩增导致的假阳性
样本中恰好存在与试剂中探针引物不完全匹配的其他细菌或病毒基因序列,可能会被敏感的试剂检测出来,从而呈现“假阳性”状态。
② 样品间交叉污染
不同病例的样本同时采集、盛放样本的容器被污染,或者样本放置时,由于密封不严导致泄露而污染其他样本。
③ PCR扩增产物或气溶胶污染
这是PCR中最主要、最常见的污染问题。PCR扩增产物拷贝量非常大(可大于108copies/mL),实验过程中,震荡离心、反应管开盖、移液器反复吸取混匀等操作都可形成气溶胶,一个气溶胶颗粒可含上万个拷贝。一旦使用被气溶胶污染的试剂、耗材或器具等,就可能出现“假阳性”结果。
④实验室中克隆质粒的污染
在用克隆质粒开展试剂生产、研发或阳性对照的实验室里,由于克隆质粒在单位容积含量相当高,质粒纯化过程也非常容易产生气溶胶,导致实验室环境的污染。在这种环境中进行检测或研究,如果实验个人防护不到位,病毒基因片段随空气吸入鼻腔,在这种情况下,在鼻拭子中可检测出病毒核酸。但这种情况下,不能说这个人感染了新冠病毒,更不会导致新冠肺炎疾病。
注:质粒在核酸检测中作为载体,被插入病毒的特定基因片段后进行复制扩增,最后得到大量病毒基因片段以便能被检测识别到。
魔高一尺,道高一丈。其实,新冠病例的确诊不仅仅依靠核酸检测,通过多部位采样、多方法检测分析,结合临床表现,可以最大程度排除“假阳性”、发现“真阳性”,避免误判发生。